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Big Endothelin-1 (1-39) (human)
 (human))
一、基本信息英文全称Big Endothelin-1 (1-39) (human)中文全称人源全长大内皮素 11–39 肽释义Big Endothelin-1大内皮素 1是人内皮素 1 无活性全长前体多肽经内皮素转化酶 ECE 切割生成成熟活性 ET-1(1-39) 代表完整 1~39 位氨基酸全长序列。三字母序列Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp-Val-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-Ser-Pro-Arg-Ser单字母序列CSCSSLMDKECVYFCHLDIIWVNTP EHVVPTYGLGSPRS氨基酸总数39 aa分子式C189H286N48O56S5分子量4286.95结构修饰说明线性全长前体肽无 N 端生物素、焦谷氨酸无 C 端酰胺修饰内皮素特征双分子内二硫键Cys¹ ↔ Cys¹⁵Cys³ ↔ Cys¹¹两组二硫键形成 N 端双环刚性骨架是 ECE 高效识别底物的必需构象3.22–39 位为羧基端 ECE 酶切识别区段即截短肽 Big Endothelin-1 (22-38) 对应区域4.含 Met 残基存在氧化失活风险。结构式二、理化性质1.紫外定量含 Trp、Tyr、Phe280 nm 紫外吸收强可紫外分光光度法定量2.稳定性要点4 个 Cys 形成双二硫环体系严禁 DTT、β- 巯基乙醇等还原剂还原会直接破坏双环结构多肽完全丧失底物活性含 Met极易氧化溶解、分装全程冰浴、减少敞口暴露空气长期冻干粉需充氮气隔氧保存Trp、Tyr、Phe 均为强光敏芳香残基配制、储存全程避光无末端封闭修饰N 端、C 端易被氨肽酶、羧肽酶、ECE 水解工作液必须现配现用3.电荷特性酸性残基Asp、Glu碱性残基Lys、His、Arg整体偏弱酸性适配 pH 6.0–7.4 PBS、人血管内皮、肺动脉平滑肌、人血浆缓冲体系4.溶解性Ser、Thr、Asn 大量亲水极性残基搭配带电氨基酸中性 PBS 常温可完全溶解5.空间构象1–15 位依靠双二硫键形成特征双环22–39 位柔性区为 ECE 结合与切割位点双环结构调控酶切催化效率。三、生物学背景人 Big ET-1 (1-39) 是内皮素前体原剪切得到的全长前体自身无显著缩血管活性内皮素转化酶 ECE 在 21 位 Ile 与 22 位 Val 之间切断肽键释放成熟 ET-1ET-1 结合 ETₐ/ETᵦ受体发挥强效缩血管、促平滑肌增殖作用是人体心血管稳态核心调控肽。四、生物学功能作为 ECE 天然全长底物体外酶切产生活性 ET-1介导血管收缩、血管重构、肺动脉高压、肾脏损伤、心肌纤维化N 端双环结构维持多肽天然折叠保证 ECE 识别与催化效率参与高血压、心衰、肺高压、肾微循环病变等病理进程。五、科研应用人肺动脉平滑肌、血管内皮原代细胞 ECE 酶活力检测、ECE 小分子抑制剂高通量筛选Pull-down 实验探究 ECE 蛋白与人 Big ET-1 全长前体的相互作用高血压、肺动脉高压、血管纤维化、肾损伤体外细胞模型人 / 猪 Big ET-1 全长前体、Big ET-2/ET-3 前体家族跨序列构效对比全长 Big ET-1 (1-39) 与截短体 Big ET-1 (22-38) 对照研究 N 端双环对 ECE 酶切活性的调控机制。六、溶解与储存规范溶解pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制全程禁止添加还原剂缩短敞口时间防止 Met 氧化、二硫键断裂冻干粉短期 - 20 ℃避光密封长期分装充氮气隔氧-80 ℃避光储存工作液单次分装避免反复冻融2~8 ℃避光存放不超过 3 天酶活实验现配现用最佳。
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